จานนับแบคทีเรียกรดแลคติก FSTest (ชนิดเจล) (25 การทดสอบ)
ภาพรวมผลิตภัณฑ์
จานนับแบคทีเรียกรดแลคติก FSTest (ชนิดเจล) เป็นอาหารเลี้ยงเชื้อจุลชีววิทยาที่เตรียมสำเร็จรูปพร้อมใช้งาน ออกแบบมาสำหรับการนับปริมาณแบคทีเรียกรดแลคติกอย่างรวดเร็วและแม่นยำ โซลูชันการทดสอบที่ทันสมัยนี้เข้ามาแทนที่ขั้นตอนการเตรียมวุ้นแบบดั้งเดิมที่ต้องใช้แรงงานมาก การนึ่งฆ่าเชื้อ และการเทอาหารเลี้ยงเชื้อลงในจานเพาะเชื้อ
ด้วยการผสานสูตรอาหารแบบเลือกสรรพร้อมตัวบ่งชี้ทางชีวเคมีคู่และเมทริกซ์เจลที่ละลายในน้ำเย็น ช่วยให้การตรวจสอบประจำวันเป็นไปอย่างราบรื่น เป็นเครื่องมือที่จำเป็นสำหรับผู้ผลิตผลิตภัณฑ์นม เครื่องดื่มหมัก อาหารฟังก์ชัน และห้องปฏิบัติการประกันคุณภาพที่ต้องการตรวจสอบจำนวนแบคทีเรียที่มีชีวิตและรับรองการปฏิบัติตามข้อกำหนดด้านความปลอดภัยของอาหารอย่างเคร่งครัด
จุดเด่นผลิตภัณฑ์และประโยชน์หลัก
· มีประสิทธิภาพสูงและประหยัดเวลา: ทดแทนการเตรียมอาหารเลี้ยงเชื้อ MRS แบบดั้งเดิมหรืออาหารเลี้ยงเชื้อพิเศษที่ยุ่งยาก เพียงแค่เปิดแผ่นฟิล์ม หยดตัวอย่างลงไปโดยตรง แล้วนำไปบ่ม
· Enzyme-Specific Visual Contrast:ใช้ซับสเตรตโครโมเจนิกที่รวมกันซึ่งถูกกำหนดเป้าหมายโดยเอนไซม์ β-galactosidase ที่ผลิตโดยแบคทีเรียกรดแลคติก โคโลนีที่เป็นบวกจะพัฒนาเป็นจุดสีน้ำเงิน-เขียวที่โดดเด่นและนับได้ง่าย
· Dual-Action pH Indicator:มีตัวบ่งชี้ค่า pH ในตัวที่แสดงความสามารถในการผลิตกรดของจุลินทรีย์ โดยการสร้างวงแหวนสีเหลืองที่มองเห็นได้รอบโคโลนี
· Flexible Incubation Protocols:ปรับใช้ได้ง่ายกับสายพันธุ์ที่ต้องการสภาวะแอนแอโรบิกทั้งแบบมาตรฐานและแบบเข้มงวด (เช่น Bifidobacterium) รองรับสูตรอาหารเพื่อสุขภาพที่หลากหลาย
· Integrated Grid Matrix for Overload Estimation: โซนทดสอบแบบวงกลมมีตารางมาตรฐานกำกับ หากมีโคโลนีจำนวนมากเกินกว่าจะนับได้โดยตรง ผู้ปฏิบัติงานสามารถคำนวณค่าเฉลี่ยของสี่เหลี่ยมบางส่วนและคูณด้วย 28 เพื่อประมาณจำนวนโคโลนีทั้งหมด
· ข้อได้เปรียบในการขนส่งที่อุณหภูมิห้อง:จานทดสอบที่ยังไม่เปิดสามารถขนส่งและจัดเก็บที่อุณหภูมิห้องได้นานถึง 15 วัน ซึ่งให้ประโยชน์ด้านค่าใช้จ่ายในการขนส่งอย่างมากก่อนการจัดเก็บในตู้เย็นระยะยาว
หลักการทางเทคนิคและการแสดงผลสี
แผ่นนับแบคทีเรียกรดแลคติก FSTest อาศัยพารามิเตอร์การเจริญเติบโตแบบคัดเลือก ร่วมกับการเปลี่ยนแปลงสีของเอนไซม์และค่า pH ที่จำเพาะ ตัวกลางแบบแห้งประกอบด้วยอาหารเลี้ยงเชื้อแบบคัดเลือก สารโครโมเจนิกจำเพาะ ตัวบ่งชี้ค่า pH และเจลดูดซับที่ละลายในน้ำเย็น
ในระหว่างการเจริญเติบโต แบคทีเรียกรดแลคติกจะผลิตเอนไซม์ β-galactosidase ซึ่งจะย่อยสารโครโมเจนิกซับสเตรตที่โหลดไว้ล่วงหน้า ในขณะเดียวกัน การผลิตกรดอินทรีย์จากการเผาผลาญของพวกมันจะลดสภาพแวดล้อม pH เฉพาะที่ลง
แบคทีเรียกรดแลคติก → การไฮโดรไลซิสของเบต้า-กาแลคโตซิเดส (โคโลนีสีฟ้าอมเขียว) + การผลิตกรด (ศักยภาพของวงแหวนสีเหลือง)
• โคโลนีบวกทั่วไป: ปรากฏเป็นจุดสีน้ำเงินอมเขียวที่ชัดเจน โดยมีหรือไม่มีรัศมีสีเหลือง
ข้อมูลจำเพาะและขีดจำกัดการตรวจจับ
พารามิเตอร์ | ข้อกำหนดผลิตภัณฑ์ |
สิ่งมีชีวิตเป้าหมาย | แบคทีเรียกรดแลคติก (จุลินทรีย์ที่ผลิต β-galactosidase) |
ตัวอย่างที่ใช้ได้ | อาหารหมักกรดแลคติกและอาหารที่มีการเติมแบคทีเรียกรดแลคติก |
ขีดจำกัดของการตรวจวัด (LOD) | 1 CFU/g (หรือ mL) |
ช่วงการนับที่เหมาะสมที่สุด | 30–300 CFU ต่อแผ่น |
สภาวะการบ่ม | ไม่ต้องการสภาวะไร้อากาศ: 36 ± 1°C ในสภาวะที่มีอากาศเป็นเวลา 24–48 ชั่วโมง |
ขั้นตอนการปฏิบัติงาน
1. การเจือจางเป็นอนุกรม (การเตรียมตัวอย่าง)
· การเจือจางเบื้องต้น 1:10: ชั่งน้ำหนักหรือวัดปริมาตรตัวอย่าง 25 กรัม (หรือมิลลิลิตร) ให้แม่นยำ และเติมลงในภาชนะที่ปลอดเชื้อหรือถุงทำให้เป็นเนื้อเดียวกันที่มีน้ำกลั่นปลอดเชื้อ, น้ำเกลือปลอดเชื้อ, หรือสารละลายบัฟเฟอร์ฟอสเฟตมาตรฐาน 225 มิลลิลิตร ทำให้เป็นเนื้อเดียวกันอย่างทั่วถึงเพื่อให้ได้สารละลายตัวอย่างที่เจือจาง 1:10
· การเจือจางต่อไป: ใช้ปิเปต 1 มล. ของสารละลาย 1:10 ใส่ลงในหลอดทดลองที่มีสารเจือจางที่ปราศจากเชื้อ 9 มล. เพื่อให้ได้อัตราส่วน 1:100 ทำซ้ำตามลำดับเพื่อให้ได้การเจือจางที่สูงขึ้น (1:1000 เป็นต้น) ตามที่ต้องการ โดยต้องใช้ปิเปตหรือปลายปิเปตที่ปราศจากเชื้อใหม่สำหรับแต่ละขั้นตอนการเจือจางแต่ละครั้ง (หมายเหตุ: ตัวอย่างของเหลวที่ไม่ได้เจือจางสามารถประเมินได้โดยตรงเมื่อจำเป็น)
2. ขั้นตอนการเพาะเชื้อ
· วางจานเพาะเชื้อลงบนพื้นผิวห้องปฏิบัติการที่ปลอดเชื้อ, พื้นผิวที่สะอาด, หรือตู้ความปลอดภัยทางชีวภาพ และลอกฟิล์มชั้นบนออก
· ใช้ปิเปตดูดสารละลายตัวอย่างที่เตรียมไว้ปริมาตร 1 มล. หยดลงตรงกลางบริเวณที่ต้องการเพาะเชื้อที่เป็นวงกลม
· ค่อยๆ ยกฟิล์มด้านบนออกอย่างระมัดระวัง โดยเคลื่อนไหวอย่างราบรื่นเพื่อหลีกเลี่ยงการกักฟองอากาศโดยสิ้นเชิง
· วางแผ่นกระจายมาตรฐานอย่างเบามือและใช้บนฟิล์มเพื่อกระจายตัวอย่างที่เป็นของเหลวให้ทั่วถึงบริเวณวงกลม ปล่อยทิ้งไว้โดยไม่รบกวนอย่างน้อย 10 วินาทีจนกว่าอาหารเลี้ยงเชื้อจะแข็งตัว (หมายเหตุ: ห้ามเปิดฟิล์มด้านบนอีกครั้งหลังจากกระจายตัวอย่างแล้ว)
· ทำการเพาะเลี้ยงบนจานเพาะเลี้ยงซ้ำ 2 จานสำหรับระดับการเจือจางที่เลือกแต่ละระดับ พร้อมกับจานควบคุมเปล่า 1 จาน
3. การตั้งค่าการบ่ม
วางจานเพาะเลี้ยงที่แข็งตัวแล้วซ้อนกันโดยให้ด้านหน้าหงายขึ้น และวางในตู้บ่มเชื้อในแนวนอน เพื่อให้แน่ใจว่าการกระจายความร้อนสม่ำเสมอ ไม่ควรวางซ้อนกันเกิน 20 จานต่อครั้ง ตั้งโปรแกรมพารามิเตอร์การบ่มเพาะตามโปรไฟล์จุลินทรีย์เป้าหมายของคุณ (ระยะแอโรบิกเทียบกับระยะแอนแอโรบิก)
Results Determination & Final Enumeration
· การนับมาตรฐาน: เลือกแผ่นที่มีการกระจายตัวของโคโลนีปานกลางภายใน 30–300 CFU คูณจำนวนโคโลนีที่นับได้โดยตรงด้วยปัจจัยการเจือจางที่สอดคล้องกัน เพื่อให้ได้จำนวนแบคทีเรียกรดแลคติกต่อกรัมหรือมิลลิลิตร รายงานผลลัพธ์สุดท้ายในหน่วย CFU/g หรือ CFU/mL
· การประมาณค่าความหนาแน่นสูงเกินพิกัด:หากจำนวนโคโลนีสูงเกินไปที่จะนับโดยตรง ให้เลือกสี่เหลี่ยมเล็ก ๆ ที่เป็นตัวแทนหลาย ๆ สี่เหลี่ยมภายในระบบกริด คำนวณจำนวนเฉลี่ยของโคโลนีต่อสี่เหลี่ยมและคูณจำนวนเฉลี่ยนั้นด้วย 28 เพื่อประมาณจำนวนโคโลนีทั้งหมดบนจานทั้งหมด คูณการประมาณนี้ด้วยปัจจัยการเจือจางของคุณ
ข้อควรระวังทางเทคนิคและการจัดการที่สำคัญ
· ⚠️ขอบเขตแรงกดทางกายภาพ: เมื่อนำจานเพาะเลี้ยงออกจากตู้บ่ม ห้ามใช้นิ้วกดลงบนบริเวณจุดเชื้อวงกลมตรงกลางโดยตรง เพราะอาจทำให้โครงสร้างเจลเสียรูปและโคโลนีเคลื่อนที่ได้
· ⚠️การป้องกันส่วนบุคคล: ผู้ปฏิบัติงานต้องสวมเสื้อกาวน์ห้องปฏิบัติการมาตรฐานและถุงมือแบบใช้แล้วทิ้งตลอดขั้นตอนทั้งหมด เพื่อให้แน่ใจในความปลอดภัยส่วนบุคคล
· ⚠️ประกาศการป้องกันแสง: ห้ามนำแผ่นเพลทสัมผัสกับแสงแดดโดยตรงหรือระบบแสงอัลตราไวโอเลต (UV) และหลีกเลี่ยงการสัมผัสกับแสงฟลูออเรสเซนต์ที่สว่างจ้าเป็นเวลานาน
· ⚠️ระเบียบการกำจัดเชื้อชีวนิรภัย: จานเพาะเชื้อที่ใช้แล้วมีเชื้อจุลินทรีย์ที่ยังมีชีวิตและทำงานอยู่ กำจัดจานเพาะเชื้อทั้งหมดทันทีหลังการทดสอบตามกฎหมายการกำจัดของเสียชีวนิรภัยระหว่างประเทศและมาตรฐานการฆ่าเชื้อ
